開機與初始調(diào)節(jié)
環(huán)境準備:確保顯微鏡放置在防振臺面,避免強光直射。檢查電源連接,開啟主機后等待光源穩(wěn)定5-10分鐘,防止電流波動影響成像穩(wěn)定性。
光學系統(tǒng)校準:旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤至低倍鏡(通常為4×或10×),調(diào)節(jié)聚光鏡高度至與物鏡工作距離匹配。通過目鏡觀察,調(diào)整瞳距使雙眼視野自然重疊,消除黑邊或重影。

樣品制備與裝載
標準制片流程:血液涂片需采用推片法形成薄厚均勻的蝶形血膜,干燥后經(jīng)甲醇固定;尿液沉渣需離心后取沉淀物涂片,避免鹽類結(jié)晶干擾。對于細菌樣本,需經(jīng)革蘭氏染色增強對比度,染色時間需嚴格控制在30秒至1分鐘。
載玻片裝載:使用專用夾具固定載玻片,確保觀察面與物鏡垂直。對于液態(tài)樣本,需加蓋玻片避免蒸發(fā),同時防止氣泡產(chǎn)生導致成像模糊。
成像調(diào)節(jié)與觀察
粗調(diào)與微調(diào)對焦:先用低倍鏡定位樣本區(qū)域,旋轉(zhuǎn)粗調(diào)旋鈕至視野出現(xiàn)模糊輪廓,再切換至高倍鏡(如40×)進行微調(diào)。注意高倍鏡下物鏡與載玻片距離縮短,需緩慢調(diào)節(jié)避免碰撞。
光強與對比度優(yōu)化:通過調(diào)節(jié)孔徑光闌控制景深,縮小光闌可增強三維結(jié)構(gòu)對比度;調(diào)節(jié)視場光闌至略小于視野范圍,減少雜散光干擾。對于透明樣本,可切換相差模式增強無染色結(jié)構(gòu)的可視性。
多模式觀察切換:根據(jù)樣本特性選擇明場、暗場或偏光模式。明場適用于染色細胞觀察,暗場可凸顯微小顆粒,偏光模式則用于晶體或纖維結(jié)構(gòu)的分析。
圖像采集與記錄
數(shù)碼成像設置:連接顯微鏡與成像系統(tǒng)后,調(diào)整曝光時間與增益參數(shù)。血液涂片觀察需采用自動曝光模式,確保白細胞核與細胞質(zhì)的細節(jié)清晰;細菌樣本觀察則需手動調(diào)節(jié)避免過曝。
結(jié)果標注與保存:使用軟件標注關(guān)鍵結(jié)構(gòu)(如異常細胞、細菌形態(tài)),保存為無損格式(如TIFF)并記錄放大倍數(shù)、染色方法等元數(shù)據(jù),確保結(jié)果可追溯與復現(xiàn)。
操作結(jié)束與維護
關(guān)機流程:先關(guān)閉光源,待冷卻后關(guān)閉主機電源。清潔物鏡與目鏡時需使用專用擦鏡紙,避免使用含酒精溶劑以防損壞鍍膜。
日常維護:定期檢查載物臺導軌潤滑度,每月涂抹微量潤滑油保持移動順暢。檢查光源壽命,及時更換老化燈泡避免成像偏色。
特殊場景處理
活體樣本觀測:如活細胞或濕片檢查,需控制環(huán)境溫濕度與觀測時間,避免樣本干燥或活性下降。
厚樣本觀察:采用“焦點堆疊”技術(shù),通過多焦面圖像合成擴展景深,確保從表面到底層的結(jié)構(gòu)均清晰可見。
通過系統(tǒng)掌握上述操作流程,檢驗科工作人員可高效、準確地完成各類樣本的顯微鏡檢測,確保診斷結(jié)果的可靠性與一致性。每個步驟的規(guī)范執(zhí)行不僅提升檢測效率,更保障了醫(yī)療決策的準確性,是臨床檢驗質(zhì)量控制的核心環(huán)節(jié)。


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