在病理診斷中,明場顯微鏡以操作簡便、成像直觀的優(yōu)勢,成為觀察病理樣品的核心工具。通過透射光直接成像,明場觀察適用于多種染色后的組織與細(xì)胞樣本,為腫瘤診斷、感染性疾病檢測及遺傳性疾病分析提供關(guān)鍵形態(tài)學(xué)依據(jù)。本文將系統(tǒng)解析病理科明場觀察的適用樣品類型及其診斷價值。
一、常規(guī)病理診斷的核心樣品類型
1. 石蠟切片(HE染色)
樣品制備:組織經(jīng)固定、脫水、包埋后制成3-5μm厚切片,經(jīng)蘇木精-伊紅(HE)染色,細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色。
觀察重點:
組織結(jié)構(gòu):識別正常組織與病變組織(如腫瘤細(xì)胞的異型性、浸潤性生長)。
細(xì)胞形態(tài):觀察細(xì)胞核大小、核質(zhì)比、核分裂象,輔助判斷腫瘤良惡性。
典型案例:
乳腺癌診斷:通過明場觀察HE染色切片,識別導(dǎo)管內(nèi)癌的細(xì)胞排列紊亂與核極性消失,確診率達(dá)95%以上。

2. 冷凍切片(快速病理診斷)
樣品制備:手術(shù)中取下的新鮮組織經(jīng)快速冷凍后切片,染色時間縮短至10分鐘內(nèi)。
觀察重點:
術(shù)中快速診斷:判斷腫瘤邊界、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況,指導(dǎo)手術(shù)方案調(diào)整。
特殊染色輔助:結(jié)合PAS染色觀察糖原,或網(wǎng)狀纖維染色評估腫瘤基底膜完整性。
典型案例:
腦腫瘤切除:通過冷凍切片明場觀察,確認(rèn)膠質(zhì)瘤邊界,避免過度切除正常腦組織,術(shù)后患者神經(jīng)功能保留率提升40%。
3. 細(xì)胞學(xué)樣本(液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測)
樣品制備:通過宮頸刷取樣或痰液、胸腹水離心后,將細(xì)胞沉淀制成薄層涂片,經(jīng)巴氏染色或HE染色。
觀察重點:
細(xì)胞異常形態(tài):識別癌細(xì)胞核增大、深染、核分裂象增多等特征。
微生物識別:觀察真菌菌絲、細(xì)菌菌落或病毒包涵體。
典型案例:
宮頸癌篩查:通過液基細(xì)胞學(xué)明場觀察,早期宮頸癌檢出率從70%提升至95%,誤診率降低至5%以下。
二、感染性疾病的病原體識別
1. 細(xì)菌與真菌感染
樣品制備:組織或分泌物經(jīng)革蘭染色、抗酸染色或PAS染色。
觀察重點:
細(xì)菌形態(tài):識別革蘭陽性菌(如葡萄球菌、鏈球菌)與革蘭陰性菌(如大腸桿菌、假單胞菌)的染色特性與排列方式。
真菌結(jié)構(gòu):觀察真菌菌絲、孢子或假菌絲(如念珠菌、曲霉)。
典型案例:
敗血癥診斷:通過血培養(yǎng)物革蘭染色切片,明場觀察發(fā)現(xiàn)革蘭陽性球菌成鏈狀排列,確診鏈球菌感染,抗生素使用針對性提升80%。
2. 寄生蟲感染
樣品制備:糞便、血液或組織活檢樣本經(jīng)碘染色、鐵蘇木素染色或吉姆薩染色。
觀察重點:
寄生蟲形態(tài):識別蛔蟲卵、血吸蟲卵、瘧原蟲環(huán)狀體等特征性結(jié)構(gòu)。
生活周期階段:區(qū)分滋養(yǎng)體、包囊或蟲卵等不同發(fā)育階段。
典型案例:
瘧疾診斷:通過薄血膜吉姆薩染色切片,明場觀察發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞內(nèi)瘧原蟲環(huán)狀體,確診惡性瘧原蟲感染,準(zhǔn)確率達(dá)99%。
3. 病毒感染
樣品制備:組織活檢或脫落細(xì)胞經(jīng)免疫組化染色或原位雜交。
觀察重點:
病毒包涵體:觀察細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)的特征性包涵體(如巨細(xì)胞病毒核內(nèi)包涵體、皰疹病毒胞質(zhì)包涵體)。
細(xì)胞病變效應(yīng):識別細(xì)胞腫脹、融合或空泡化等病毒感染特征。
典型案例:
COVID-19病理分析:通過肺組織切片HE染色,明場觀察發(fā)現(xiàn)肺泡上皮細(xì)胞脫落、透明膜形成及單核細(xì)胞浸潤,為疫情病理機(jī)制研究提供依據(jù)。
三、遺傳性疾病與代謝性疾病的病理分析
1. 遺傳性疾病
樣品制備:皮膚、黏膜或血液樣本經(jīng)特殊染色(如PAS染色、鐵染色)。
觀察重點:
代謝產(chǎn)物沉積:識別糖原、黏多糖或脂質(zhì)在組織中的異常沉積(如糖原貯積癥、黏多糖貯積癥)。
細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常:觀察細(xì)胞器形態(tài)改變(如線粒體肌病的線粒體嵴結(jié)構(gòu)異常)。
典型案例:
戈謝病診斷:通過骨髓切片PAS染色,明場觀察發(fā)現(xiàn)戈謝細(xì)胞(胞質(zhì)內(nèi)充滿洋蔥皮樣沉積物),確診率達(dá)98%。
2. 代謝性疾病
樣品制備:肝、腎或胰腺組織經(jīng)特殊染色(如Masson染色、剛果紅染色)。
觀察重點:
纖維化程度:評估肝纖維化分期(如S0-S4)或腎小球硬化程度。
淀粉樣變性:觀察剛果紅染色后在偏光顯微鏡下的蘋果綠雙折射現(xiàn)象(需結(jié)合明場觀察定位)。
典型案例:
糖尿病腎病診斷:通過腎穿刺活檢切片,明場觀察腎小球系膜基質(zhì)增多、基底膜增厚,結(jié)合電鏡確認(rèn)結(jié)節(jié)性腎小球硬化,確診率提升30%。
四、明場觀察的技術(shù)優(yōu)勢與局限性
1. 核心優(yōu)勢
操作簡便:無需復(fù)雜調(diào)試,適合快速診斷。
成本低廉:設(shè)備與試劑成本遠(yuǎn)低于電子顯微鏡或分子檢測技術(shù)。
形態(tài)學(xué)直觀:直接呈現(xiàn)組織與細(xì)胞形態(tài),為病理診斷提供“金標(biāo)準(zhǔn)”依據(jù)。
2. 局限性
分辨率限制:無法觀察病毒顆?;蚣{米級超微結(jié)構(gòu)(需結(jié)合電子顯微鏡)。
依賴染色技術(shù):低對比度樣品(如未染色細(xì)胞)成像效果有限。
主觀性較強(qiáng):診斷結(jié)果受病理醫(yī)生經(jīng)驗影響較大(需結(jié)合免疫組化或分子檢測輔助)。
病理科醫(yī)用顯微鏡明場觀察方式以其操作簡便、成本低廉、形態(tài)學(xué)直觀的優(yōu)勢,成為病理診斷中不可或缺的基礎(chǔ)工具。從常規(guī)HE染色切片的觀察,到感染性疾病的病原體識別,再到遺傳性疾病的代謝產(chǎn)物沉積分析,明場觀察的技術(shù)進(jìn)步將持續(xù)推動病理診斷的效率與準(zhǔn)確性提升。未來,隨著數(shù)字化、智能化與多模態(tài)技術(shù)的融合,明場觀察將朝著更高效、更**、更綜合的方向發(fā)展,為**醫(yī)療與個體化治療提供更強(qiáng)大的支持。


津公網(wǎng)安備12011002023087號
客服1