透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)是利用高能電子束充當(dāng)照明光源而進(jìn)行放大成像的大型顯微分析設(shè)備。1933年,德國(guó)科學(xué)家盧斯卡(Ruska)和克諾爾(Knoll)研制出了世界上**臺(tái)透射電鏡(見(jiàn)圖1),并在1939年由西門(mén)子公司以這臺(tái)電鏡為樣機(jī),量產(chǎn)了**批商品透射電鏡,約40臺(tái),分辨能力比光學(xué)顯微鏡提高了20倍。從此,人類(lèi)對(duì)微觀世界的科學(xué)研究有了更強(qiáng)有力的武器。到今天,透射電鏡已經(jīng)誕生了70多年,由電鏡應(yīng)用而形成的交叉性學(xué)科——電子顯微學(xué)已經(jīng)日趨完善,電鏡的分辨能力也比*初時(shí)提高了超過(guò)100倍,達(dá)到了亞埃級(jí),并且在自然科學(xué)研究中起到日益重要的作用。
透射電子顯微鏡的特點(diǎn)
1)由于樣品制備技術(shù)的限制,對(duì)大多數(shù)生物樣品來(lái)說(shuō),一般只能達(dá)到2nm的分辨率。
2)電鏡圖像的分辨能力不僅取決于電鏡本身的分辨率,而且取決于樣品結(jié)構(gòu)的反差。
3)電鏡所用的光源是電子波,波長(zhǎng)在非可見(jiàn)光
范圍內(nèi)無(wú)顏色反應(yīng),所形成的圖像是黑白圖像,要求圖像必須具有一定的反差。
4)生物體組織和細(xì)胞成分主要有C\H\O\N等輕元素組成,它們的原子序數(shù)較低,電子散射能力弱,相互之間的差別又很小,電鏡下的圖像反差一般較低。
5)由于電子束的穿透能力較弱,樣品必須制成超薄切片。
6)觀察面小,載網(wǎng)直接能夠?yàn)?mm,超薄切片范圍為0.3-0.8mm.
7)電子束的強(qiáng)烈照射,易損傷樣品,發(fā)生變形、升華等,甚至被擊穿破裂,可能使觀察結(jié)構(gòu)產(chǎn)生假象。
8)觀察時(shí)電鏡鏡筒必須保持真空,為了保證樣品在真空下不損傷,對(duì)樣品要求應(yīng)無(wú)水分。因此,不能觀察活體的生物樣本。
9)生物制樣復(fù)雜,在步驟繁多的制樣過(guò)程中,樣品容易產(chǎn)生收縮、膨脹、破碎以及內(nèi)含物丟失丟失等結(jié)構(gòu)改變。


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